霉菌毒素的來(lái)源、危害及限量標準

◆  2010年-2017年中國生豬的出欄量

◆  2010年-2017年中國配合飼料生產(chǎn)量

◆  霉菌毒素污染所帶來(lái)的經(jīng)濟損失

近年來(lái)，霉菌毒素的污染對農業(yè)和畜牧業(yè)生產(chǎn)造成了巨大經(jīng)濟損失，僅煙曲霉毒素每年對亞洲養豬業(yè)造成的經(jīng)濟損失可能高達11億美元。據聯(lián)合國糧食與農業(yè)組織(FAO)統計，全球每年約有25%的農作物被霉菌毒素污染，約2%的農作物因污染嚴重而失去營(yíng)養和經(jīng)濟價(jià)值，造成數百億美元的經(jīng)濟損失。

◆  飼料中霉菌毒素污染情況

目前，全世界飼料業(yè)和養殖業(yè)都面臨著(zhù)飼料原料或者動(dòng)物日糧霉菌毒素污染的困擾。隨著(zhù)全球異常氣候的頻發(fā)，以及全球谷物貿易的日益頻繁，在動(dòng)物配合飼料中常常有來(lái)自不同地域的谷物，大大增加了飼料受多種霉菌毒素污染的風(fēng)險。

◆  霉菌毒素污染的全球分布

全球谷物飼料中霉菌毒素污染都十分普遍和嚴重。各類(lèi)原料和飼料、各個(gè)地區、各個(gè)季節均有霉菌毒素污染，檢出率可高達70%～100%，按照飼料衛生標準判定的毒素超標率可達20%～80%。污染飼料的檢出毒素少者2～3種，多者7～8種，呈現多種霉菌毒素復合污染的特征。

◆  霉菌毒素的來(lái)源

自然界霉菌種類(lèi)極多，約12萬(wàn)種，其中能產(chǎn)生霉菌毒素的有170余種，廣泛存在于土壤空氣水及腐敗有機物中，遍及全世界。霉菌毒素約有300多種，主要由四種霉菌屬產(chǎn)生：曲霉菌屬（主要分泌黃曲霉毒素、赭曲霉毒素等）、青霉菌屬（主要分泌桔霉素等）麥角菌屬（主要分泌麥角毒素）、梭菌屬（主要分泌嘔吐毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、伏馬鐮孢毒素等）。

◆  收獲前霉菌毒素的污染

任何生長(cháng)中的農作物，包括飼草和谷物等，都容易受到霉菌的污染同時(shí)產(chǎn)生霉菌毒素。霉菌在隨農作物由田間向飼料加工廠(chǎng)再向飼料槽的轉換過(guò)程中，可能不會(huì )存活下來(lái)，但是霉菌毒素卻完整地保留了下來(lái)。

飼料原料看上去顏色外觀(guān)都不錯，常規指標檢測分析結果也不錯。但往往就是這些不錯的原料很可能早就已經(jīng)成為霉菌毒素的“避風(fēng)港”了。

◆  收獲后霉菌毒素的污染

收獲后的農作物，如果在貯存、運輸、加工、保藏的過(guò)程中，外環(huán)境滿(mǎn)足霉菌的生長(cháng)需求，霉菌是會(huì )繼續生長(cháng)產(chǎn)毒。此時(shí)霉菌毒素會(huì )一直積累疊加，最終危害動(dòng)物機體而不自知。曲霉菌 (Aspergillu) 和青霉菌 (Penicillium)是作物收獲后導致作物霉變危害最大的霉菌。

◆  谷物及飼料中主要產(chǎn)毒霉菌及其霉菌毒素

◆  霉菌毒素的特性

一、高效性

很低的濃度即能產(chǎn)生明顯的毒性(μg/kg)。在污染比較嚴重的幾種霉菌毒素當中，黃曲霉毒素 B1(AFB1) 是具有很強毒性的一種毒素，其毒性是氰化鉀的 10 倍，砒霜的68 倍，被世界衛生組織的腫瘤研究機構(IARC)列為Ⅰ類(lèi)致癌物質(zhì)。

二、高穩定性

低分子化合物，非常穩定，可耐高溫。黃曲霉毒素具有比較穩定的化學(xué)性質(zhì)，只有在 280℃以上高溫下才能被破壞，對熱不敏感，100℃ /20h 也不能將其完全去除。

三、富集性

抗化學(xué)生物制劑及物理的滅能作用，可以在生物鏈中不斷傳播、富集。原本被分泌及污染而殘留在土壤中的霉菌毒素會(huì )被后來(lái)種植的谷物所吸收，從而引起更多霉菌毒素污染及感染的問(wèn)題。

四、特異性

分子結構不同，毒性相差很大。如黃曲霉毒素族有黃曲霉毒素 B1、B2、M1、M2，毒性均不一樣。

五、相加協(xié)同效應

霉菌毒素之間相互作用: 霉菌毒素的相乘作用，飼料或原料中往往不止含一種毒素，至少含有2種以上。兩種或兩種以上的毒素在一起產(chǎn)生的毒性作用比任何一種毒素單獨產(chǎn)生的毒性都大 ，即當多種毒素同時(shí)存在時(shí)，不同毒素的毒性會(huì )增加，呈現協(xié)同或增加的現象 ，不同原料配制而成的全價(jià)料會(huì )有不同的毒素混合污染，毒素間的協(xié)同作用將會(huì )導致毒力大大增強，給畜禽帶來(lái)巨大的危害。

多種霉菌毒素危害的疊加效應表

六、污染地域性

動(dòng)物飼料及農產(chǎn)品中霉菌毒素的產(chǎn)生具有一定的地域性。例如，熱帶和亞熱帶區域是曲霉菌生長(cháng)的最佳環(huán)境。盡管如此，飼料和農產(chǎn)品貿易的全球化導致霉菌毒素在全世界范圍內傳播。

七、隱蔽性

霉菌毒素檢測時(shí)也常受到小分子物質(zhì)(糖苷、葡糖苷酸、脂肪酸酯和蛋白質(zhì) ) 的掩蓋，這些小分子物質(zhì)與霉菌毒素結合在一起，導致檢測值為錯誤的陰性結果。最終，這些被掩蓋的霉菌毒素不能被傳統的分析方法所檢測。但這些結合到霉菌毒素上的分子可能在消化過(guò)程中被解除，從而釋放出霉菌毒素，危害動(dòng)物健康。

◆  常見(jiàn)霉菌毒素的污染基質(zhì)及危害

◆  霉菌毒素對豬和牛的危害

◆  霉菌毒素對動(dòng)物機體的致病模式

◆  新飼料衛生標準中黃曲霉毒素B1的限量標準

◆  新飼料衛生標準中玉米赤霉烯酮的限量標準

◆  新飼料衛生標準中嘔吐毒素的限量標準

◆  新飼料衛生標準中赭曲霉毒素A的限量標準

◆  新飼料衛生標準中T-2毒素的限量標準

◆  新飼料衛生標準中伏馬菌素的限量標準

霉菌毒素常用檢測方法介紹與對比

◆  霉菌毒素常用檢測方法

?  薄層色譜法

該方法目前已基本退出嘔吐毒素檢測的歷史舞臺！

?  儀器分析方法(HPLC/HPLC-MS)

本方法主要用于可疑樣本、疑似陽(yáng)性樣本的最終確證和法檢。

?  酶聯(lián)免疫分析方法（ELISA）

本方法為傳統快檢方法，應用非常廣泛，但隨著(zhù)快速定量檢測試紙技術(shù)的成熟和普及，正被快速替代。

?  膠體金免疫層析法

本方法應用非常廣泛，主要用于樣品的初篩，結果以定性或半定量為主。

?  熒光定量免疫層析法

本方法為南京微測生物率先在真菌毒素檢測領(lǐng)域推出，因其快速簡(jiǎn)便準確定量的優(yōu)點(diǎn)，正快速替代膠體金試紙條和酶免試劑盒等傳統快檢產(chǎn)品，實(shí)現快檢方法從粗略定性到準確定量的升級換代。

◆  不同方法學(xué)性能對比

◆  真菌毒素檢測如何正確抽樣

真菌毒素的檢測誤差一直是糧油、飼料等領(lǐng)域令檢驗化驗人員非常頭疼的問(wèn)題，有時(shí)甚至會(huì )達到百分之幾百的偏差，誤差的來(lái)源和影響因素非常之多，如檢測產(chǎn)品本身、操作流程和細節掌握程度、實(shí)驗環(huán)境和條件、不同種類(lèi)樣品的基質(zhì)效應等，其中影響最大的一個(gè)因素--抽樣。

◆  抽樣的關(guān)鍵性

1、真菌毒素在樣品中的分布是不均勻的

下圖以蛋白質(zhì)和真菌毒素在樣品中的分布情況向我們表明真菌毒素分布的及其不均勻性。

2、真菌毒素檢測的精度都在ppb級別

ppb即10億分之一，是一個(gè)非常微量的單位，沒(méi)有足夠的抽樣量，會(huì )造成很大的誤差影響。下表為美國農業(yè)部提供的信息，在一卡車(chē)玉米中加標20ppb的黃曲霉毒素污染情況。

◆  抽樣注意事項

1、抽樣的原則

由于真菌毒素分布的隨機性，抽樣的時(shí)候要做到多點(diǎn)、隨機、均勻，使得每個(gè)部位都有相同的概率被取到。

2、抽樣的數量

FAO和WTO建議沒(méi)200公斤物料抽樣一次，如果所抽樣品是混合比較均勻的粉狀物料，可以適當的減少抽樣點(diǎn)數。在實(shí)際工作中由于人力、物力有限，所以在實(shí)際操作中抽樣點(diǎn)數應根據企業(yè)實(shí)際情況以及物料情況來(lái)確定抽樣點(diǎn)數。

3、抽樣量

原料送檢樣品抽樣成品可在500g，原料樣品在1000g，這樣可以保證檢測的最低檢測量和檢測樣品的霉菌毒素的分布均一性。

南京微測熒光定量快速檢測方法介紹

◆  免疫學(xué)快速檢測的發(fā)展歷程

南京微測生物自主開(kāi)發(fā)的基于熒光納米微球的時(shí)間分辨熒光快速定量檢測技術(shù)平臺，因其具有靈敏度高、定量范圍寬、準確度和精密度高、穩定性強、操作快速簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，被業(yè)界譽(yù)為第四代熒光定量免疫層析技術(shù)中“皇冠上的明珠”，正快速替代膠體金試紙條和酶聯(lián)免疫試劑盒等傳統快速檢測產(chǎn)品，引領(lǐng)真菌毒素快速檢測從粗略定性到準確定量的升級換代。 

◆  南京微測熒光定量FPOCT快速檢測技術(shù)平臺

◆  檢測原理

當將樣品滴加在加樣區時(shí)，樣品中的待測物與結合墊中的熒光微球標記抗體結合并通過(guò)毛細作用向前層析，當 達到檢測區后，檢測線(xiàn)T線(xiàn)上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標記抗體結合，檢測線(xiàn)T線(xiàn)上結合的熒光微球標記抗體的量與樣品中待測物的量成反比，質(zhì)控線(xiàn)C線(xiàn)結合的熒光標記物樣品中待測物的量無(wú)關(guān)，其它熒光標記物繼續層析達到吸收區。層析結束后，采用熒光讀數儀的讀取T線(xiàn)和C線(xiàn)的熒光強度并計算T/C值，通過(guò)儀器內置的標準曲線(xiàn)即可計算出 樣品中待測物的含量。

◆  Microdetection系列熒光微球

 Microdetection?系列熒光微球采用聚苯乙烯納米微球對稀土熒光離子銪進(jìn)行包裹，通過(guò)熒光預增強技術(shù)，提升單個(gè)熒光離子的熒光強度。通過(guò)對包裹技術(shù)的優(yōu)化和改良，納米微球中銪離子的密度可提升到10萬(wàn)個(gè)/微球，包裹完熒光離子后，在微球表面再進(jìn)行葡聚糖修飾，大大提升了微球的穩定性和對可逆環(huán)境的抗干擾性。在此基礎上可開(kāi)發(fā)出靈敏度高于普通膠體金或有色乳膠免疫層析方法2-3個(gè)數量級的定量檢測技術(shù)。

◆  熒光染料稀土元素銪的特點(diǎn)

◆  雙T線(xiàn)定量檢測技術(shù)

目前，普通免疫層析快檢產(chǎn)品通常采用單檢測線(xiàn)（T線(xiàn)）定量方法，產(chǎn)品研發(fā)周期更短，生產(chǎn)工藝更為簡(jiǎn)單，成本也更低，但檢測結果的精密度難以控制，導致結果的重復性較差。我們在單T線(xiàn)的基礎上，增加了一條矯正T線(xiàn)，與質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）一起，形成“雙保險”，大大提升了檢測結果的精密度和重復性。

◆  溯源管理云平臺

為滿(mǎn)足集團公司或政府監管部門(mén)對各個(gè)子公司或下級單位檢測數據的信息化、智能化管理需求，南京微測開(kāi)發(fā)了基于阿里云的溯源管理云平臺。檢測儀內置GPRS無(wú)線(xiàn)通信模塊（可自主選擇打開(kāi)或關(guān)閉），開(kāi)通該功能后，檢測信息和結果可實(shí)時(shí)上傳云平臺，實(shí)現儀器端、電腦端和手機端的數據同步共享，通過(guò)云平臺可實(shí)現檢測結果分析、質(zhì)量安全溯源、安全預警、全過(guò)程質(zhì)量控制、系統遠程更新、標準曲線(xiàn)下載、功能權限設置等功能，既滿(mǎn)足了檢測信息和數據的智能化網(wǎng)絡(luò )化管理，又確保了檢測數據的安全可控。

◆  FD-100型霉菌毒素快速檢測儀（經(jīng)典版）

功能：

可快速準確定量的測定出飼料原料及飼料成品中真菌毒素的具體含量，包括黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、伏馬菌素、T-2毒素等；

特點(diǎn)：

1、儀器小巧便攜，操作簡(jiǎn)便，易學(xué)易會(huì )；

2、結果準確可靠，穩定性和重復性好；

3、經(jīng)濟實(shí)惠，好用還不貴；

◆  FD-600型霉菌毒素快速檢測儀（升級版）

◆  霉菌毒素熒光定量快檢箱--現場(chǎng)檢測

◆  南京微測嘔吐毒素熒光定量快速檢測產(chǎn)品優(yōu)勢

?  方法領(lǐng)先：國內首個(gè)食品安全FPOCT熒光定量快速檢測技術(shù)平臺，引領(lǐng)行業(yè)方向；

?  升級換代：替代膠體金和酶聯(lián)免疫傳統快檢方法，實(shí)現從粗略定性到準確定量的升級換代；

?  快速簡(jiǎn)便：一步加樣，8min出定量結果，極簡(jiǎn)的操作，讓檢測過(guò)程不再繁瑣；

?  準確定量：基于熒光納米微球定量原理，結果高度符合國標法，穩定可靠；

?  隨到隨檢：無(wú)需使用標準品，無(wú)需做標準曲線(xiàn)，樣品隨到隨檢，現場(chǎng)出定量結果；

?  聯(lián)網(wǎng)溯源：檢測數據和信息可實(shí)時(shí)傳送云平臺，實(shí)現檢測數據的信息化、智能化管理需求；

?  權威驗證：以?xún)?yōu)異成績(jì)國糧局及農科院質(zhì)量標準研究所驗證和評審；

?  安全環(huán)保：操作人員不接觸標準品，檢測卡封閉設計，避免對操作人員可能的傷害；

?  小巧便攜：檢測儀器小巧便攜，既可用于實(shí)驗室檢測，也可用于原糧收購現場(chǎng)檢測；

?  經(jīng)濟實(shí)惠：取代膠體金試紙條和酶免試劑盒，獲得國標法的準確結果，省時(shí)省力省錢(qián)；

◆  南京微測霉菌毒素熒光定量快速檢測產(chǎn)品技術(shù)性能

◆  檢測樣本適用范圍

◆  飼料成品及原料復雜樣本專(zhuān)用檢測試紙條

除玉米、小麥、高粱等簡(jiǎn)單原糧樣品外，飼料領(lǐng)域還會(huì )涉及諸多復雜的樣本，如復合飼料成品、飼料原料如DDGS、各種粕類(lèi)、噴漿玉米皮、醬油糟、米糠、魚(yú)粉、麩皮等，因其成分復雜、蛋白或脂肪含量偏高、有背景顏色、pH偏酸及其他影響因素，一般方法很難準確檢測，假陽(yáng)性現象尤其突出。

南京微測生物基于熒光納米微球的熒光定量FPOCT快速定量檢測技術(shù)，因其特有的時(shí)間分辨熒光功能，很好的解決這些特殊樣本的檢測難題，推出了針對飼料領(lǐng)域復雜樣品的專(zhuān)用試紙條，檢測結果跟國標方法高度符合。

◆  樣品前處理過(guò)程

1、粉碎，稱(chēng)量;

2、加樣品提取液提取(5min);

3、離心;

◆  上樣檢測操作過(guò)程

1、稀釋

2、加樣，反應;

3、讀數，打印檢測報告;

◆  國糧局糧科院驗證報告

◆  國糧局標準質(zhì)量中心驗證評審報告

◆  山東省糧油檢測中心和浙江省食藥監局驗證報告

◆  中國農科院質(zhì)量標準與檢測技術(shù)研究所驗證

◆  申請專(zhuān)利及軟著(zhù)19項

◆  已合作代表性客戶(hù)

◆  公司資質(zhì)